Testy na lymskú boreliózu by sa mali vykonať vždy, keď dôjde k uhryznutiu kliešťa. Na začatie diagnostiky musíte počkať až niekoľko týždňov. Predtým je možné otestovať kliešť, ktorý nás pohrýzol, či je nosičom nejakej choroby. Aké je testovanie na lymskú boreliózu a aká je cena testov?
Testovanie na lymskú boreliózu (bakteriálne ochorenie prenášané kliešťami spôsobené Borrelia burgdorferi a jeho odrodami) sa odporúča vykonať čo najskôr po uštipnutí kliešťom.
Pri diagnostike lymskej boreliózy sa používajú špecifické diagnostické schémy, ktoré sú založené predovšetkým na sérologických metódach.
Berúc do úvahy komplexný patomechanizmus ochorenia a obmedzenia laboratórnych metód však môže lymská borelióza spôsobiť mnoho diagnostických ťažkostí.
Preto je na trhu stále viac a viac laboratórnych testov, ktoré by mohli tento problém vyriešiť. Väčšina z nich, bohužiaľ, nemá preukázanú diagnostickú hodnotu a nemali by sa používať pri bežnej diagnostike lymskej boreliózy.
Obsah:
- Skorá lokálna borelióza - laboratórne testy
- Skorá diseminovaná borelióza - test na boreliózu
- Neskorá borelióza - aké testy na zistenie boreliózy?
- Lymská borelióza - monitorovanie liečby
- Lymská borelióza - cirkulujúce imunokomplexy
- Lymská borelióza - test transformácie lymfocytov (LTT)
- Lymská borelióza - test CD57
- Berlioz - test ELFA a CLIA
- Lymská borelióza - vyšetrenie kliešťa odstráneného z kože
Skorá lokálna borelióza - laboratórne testy
V tomto štádiu po kontakte s infikovaným kliešťom dochádza k lokálnej infekcii a k tzv migrujúci erytém (latinsky erythema migrans), ktorý je príznakom charakteristickým pre lymskú boreliózu.
Prítomnosť erytému v mieste uhryznutia kliešťom je dostatočná na zistenie infekcie boréliami. Počiatočné štádium lokálnej boreliózy trvá niekoľko dní až približne 4 týždňov a u pacienta sa môžu vyvinúť príznaky podobné chrípke.
Je to najskoršie štádium infekcie, v ktorom môžu sérologické metódy (ELISA a Western blot), testovanie na prítomnosť protilátok IgM a IgG, poskytnúť falošne negatívne výsledky. V tejto fáze tzv sérologické okno, čo je počiatočné obdobie infekcie, keď telo ešte neprodukuje protilátky proti boréliám.
Prvé protilátky IgM sa objavujú okolo 2. týždňa choroby, ale u väčšiny ľudí je ich prítomnosť zistená až za niekoľko týždňov. V prípade negatívneho sérologického výsledku by sa mal test opakovať približne 3-4 týždne po infekcii.
Program ELISA a Western blot uhrádza Národný fond zdravia, avšak odosielateľ lekára musí mať oprávnenie na ich objednanie. Súkromne stojí test ELISA od 30 do 100 PLN a Western blot od 80 do 200 PLN.
Molekulárne testovanie PCR možno zvážiť vo veľmi skorom štádiu infekcie. Metóda detekuje bakteriálny genetický materiál (DNA), ktorý je v počiatočnom štádiu infekcie najhojnejším obsahom telesných tekutín. Čím dlhší je čas od infekcie, tým je menšia pravdepodobnosť detekcie bakteriálnej DNA.
Je však potrebné mať na pamäti, že v Poľsku stále neexistuje štandardizácia molekulárnych metód pri diagnostike lymskej boreliózy, a preto sa táto metóda neodporúča ako diagnostický nástroj. Molekulárne testovanie neprepláca Národný fond zdravia a náklady medzi 160-200 PLN.
Mali by ste vedieť
Fázy infekcie Borrelia burgdorferi:
- skorá lokálna borelióza
- skorá diseminovaná lymská borelióza
- neskorá borelióza
Skorá diseminovaná borelióza - test na boreliózu
Vo fáze skorej diseminovanej boreliózy je infikovaných veľa orgánov, kĺbov, svalov, nervového systému a obehového systému. Skorá borelióza sa vyvíja s bolesťami hlavy, zápalmi tvárového nervu, únavou alebo stuhnutím krku. Táto fáza trvá asi niekoľko týždňov po infekcii.
V štádiu skorej diseminovanej boreliózy sú prítomné hlavne protilátky IgM. 6-8 týždňov po infekcii sa tiež začínajú objavovať protilátky IgG. Preto sú sérologické metódy základom diagnostiky v tomto štádiu infekcie.
Sérologická diagnostika lymskej boreliózy sa začína fázou skríningu, t. J. Vykonaním citlivého testu ELISA.
Ak je výsledok negatívny, znamená to, že neboli zistené žiadne spirochéty borélie alebo je výsledok falošne negatívny. Ak je výsledok pozitívny alebo slabo pozitívny, malo by sa vykonať potvrdzujúce testovanie Western blot, ktoré je veľmi špecifické, aby sa potvrdili výsledky metódy ELISA.
Ak existuje podozrenie na neuroboreliózu, je možné vykonať molekulárne PCR testovanie z mozgovomiechového moku. Metóda PCR je veľmi citlivá a vzhľadom na to, že počet spirochét Borrelia v mozgovomiechovom moku je malý, môže byť pri diagnostike užitočná.
Bez predchádzajúcich sérologických testov to však neznamená diagnózu infekcie.
Neskorá borelióza - aké testy na zistenie boreliózy?
Posledným štádiom infekcie je neskorá lymská borelióza, pri ktorej dochádza k ďalšiemu šíreniu baktérií do orgánov a tvorbe čoraz vážnejších komplikácií infekcie. Objavuje sa neskorá borelióza, kĺbová borelióza alebo atrofická dermatitída. Neskorá borelióza môže trvať až niekoľko rokov.
V tomto štádiu infekcie sa sérologickými metódami detegujú iba protilátky IgG. Vysoká hladina IgG proti spirochétam borélií a prítomnosť symptómov naznačujú boreliózu. Avšak v niektorých prípadoch (najmä u ľudí, ktorí dostali antibiotickú terapiu veľmi rýchlo v počiatočných štádiách infekcie) môžu protilátky IgM pretrvávať niekoľko rokov. V takýchto situáciách tieto protilátky nenaznačujú aktívnu infekciu.
Čo je to borelióza?
Lymská borelióza - monitorovanie liečby
Jednou z najväčších ťažkostí pri diagnostike lymskej boreliózy je nedostatok citlivých a špecifických laboratórnych markerov, ktoré dokážu posúdiť účinnosť antibiotickej liečby. Na stanovenie jeho účinnosti sa štandardne používa pozorovanie príznakov ochorenia.
Štúdie naznačujú, že stanovenie hladín IgM a IgG protilátok proti spirochetovému antigénu VLsE / C6 sa môže použiť na sledovanie účinnosti infekcie boreliou.
Špirálový proteín VlsE / C6 spôsobuje veľmi silnú a rýchlu reakciu imunitného systému. Pridanie tohto antigénu k súboru sérologických testov významne zvyšuje citlivosť testu. Prítomnosť IgG protilátok proti proteínu VLsE / C6 u pacientov s lymskou boreliózou je:
- 20 - 50% u pacientov v počiatočnom štádiu infekcie
- 70 - 90% u pacientov s včasne diseminovanou boreliózou
- takmer 100% u pacientov s neskorou boreliózou
Vyšetrenie neprepláca Národný fond zdravia a náklady sa pohybujú medzi 80 - 150 PLN.
Lymská borelióza - cirkulujúce imunokomplexy
Sérologické testy sú základom pre diagnostiku boreliózy. Existujú však klinické situácie, ktoré môžu spôsobiť, že tieto testy budú falošne negatívne. Jedným z nich je prítomnosť tzv imunokomplexy, ktoré pozostávajú z antigénov borélie a špecifických protilátok IgM alebo IgG.
Imunitné komplexy blokujú protilátky, čo znemožňuje detekciu sérologickými metódami, a preto môžu spôsobiť falošne negatívne výsledky. Tento problém sa vyskytuje hlavne pri veľmi intenzívnych infekciách.
Ak má pacient zjavné príznaky boreliózy a výsledky testu sú negatívne, niektoré laboratóriá ponúkajú test, ktorý spočíva v chemickom rozklade imunitných komplexov. Toto ošetrenie je zamerané na uvoľnenie protilátok a až potom na meranie ich koncentrácie.
Výskum naznačuje, že použitie takéhoto postupu pred sérologickým vyšetrením môže významne zvýšiť detekciu protilátok proti antigénom borélie. Táto metóda sa však rutinne nepoužíva z dôvodu chýbajúcej štandardizácie v laboratóriách.
Cena testu sa pohybuje medzi 110 - 210 PLN (za protilátku IgM alebo IgG) a nie je hradená z prostriedkov Národného fondu zdravia.
Lymská borelióza - test transformácie lymfocytov (LTT)
Test transformácie lymfocytov (LTT) sa používa v rôznych oblastiach medicíny vrátane v transplantológii, alergológii a nepriamo v diagnostike spirochét Borrelia. Pri diagnostike lymskej boreliózy test identifikuje prítomnosť imunitných buniek v krvi pacienta (T lymfocyty), ktoré boli v kontakte s baktériami. Pri teste sa používa technika ELISPOT, ktorej princíp je podobný metóde ELISA, ale je citlivejšia ako ona.
Niektorí navrhujú, aby sa testovanie LTT na spirochéty borélie malo vykonávať s cieľom:
- potvrdenie aktívnej infekcie u ľudí s pozitívnymi výsledkami sérologických testov, ale bez príznakov jasne naznačujúcich ochorenie
- potvrdenie aktívnej infekcie u jedincov s negatívnymi alebo hraničnými sérologickými testami, ale s klinickými príznakmi ochorenia
- sledovanie infekcie po liečbe antibiotikami
- hodnotenie recidívy lymskej boreliózy
Podľa odporúčaní pracovnej skupiny publikovaných v roku 2014 sa pri diagnostike lymskej boreliózy neodporúča test LTT ani stanovenie hladiny protilátok v cirkulujúcich imunitných komplexoch.
Tieto metódy musia ešte prejsť validáciou (t. J. Potvrdením ich spoľahlivosti), aby boli užitočným diagnostickým nástrojom.
Cena testu sa pohybuje od 400 do 550 PLN a Národný fond zdravia ho nehradí.
Lymská borelióza - test CD57
Povrchový marker CD57 je proteín, ktorý sa vyskytuje na povrchu buniek imunitného systému - Natural Killers (NK bunky).
Lekári zo skupiny ILADS, teda z Medzinárodnej spoločnosti pre lymskú boreliózu a príbuzné choroby, sa domnievajú, že v chronickej fáze lymskej boreliózy je imunitný systém potlačený, čo sa prejaví znížením populácie NK buniek pomocou markeru CD57.
Predpokladajú, že meranie ich počtu v krvi sa môže použiť na hodnotenie aktivity ochorenia. Avšak rovnako ako pri metóde LTT a narušení imunitných komplexov, aj pri tejto metóde je potrebné validáciu. Cena testu sa pohybuje okolo 170 PLN a nie je hradený z prostriedkov Národného fondu zdravia.
Viac o teste CD57 nájdete tu.
Berlioz - test ELFA a CLIA
Pri diagnostike lymskej boreliózy sa primárne používa metóda ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay). Mnohé laboratóriá však používajú aj iné sérologické metódy, ako napríklad ELFA (Enzyme Linked Fluorescent Assay) vykonávané s Vidas® a CLIA (Chemiluminescent Immunoassay) vykonávané s analyzátorom Liaison®.
Čím sa líšia? Princíp činnosti týchto troch metód je veľmi podobný a využíva špecifické protilátky a ich schopnosť viazať sa na antigény. Metódy ELFA a CLIA umožňujú automatizáciu analýz a rýchlejšie vykonávanie testov v laboratóriu. Tieto metódy sú tiež schopné detegovať nižšie koncentrácie protilátok v testovanom biologickom materiáli.
Pokiaľ ide o spoľahlivosť výsledkov získaných týmito tromi metódami, sú takmer rovnaké. Pozitívne alebo slabo pozitívne výsledky získané metódami ELFA a CLIA, rovnako ako v prípade metódy ELISA, by sa mali potvrdiť metódou Western blot.
Lymská borelióza - vyšetrenie kliešťa odstráneného z kože
Niektoré laboratóriá ponúkajú testovanie kliešťa odstráneného z kože na prítomnosť borélií DNA. Podľa odporúčaní pracovnej skupiny zverejnených v roku 2014 takáto štúdia absolútne nie je diagnostickou metódou lymskej boreliózy.
Aj keď riziko prenosu baktérií z kliešťov na človeka je úmerné času sania krvi, prítomnosť DNA spirochét v kliešťoch nie je synonymom infekcie a jej absencia infekciu nevylučuje.
Navrhovatelia metódy sa domnievajú, že je užitočné pri rozhodovaní o zavedení antibiotickej liečby u ľudí s príznakmi svedčiacimi o lymskej borelióze, ale bez prítomnosti migračného erytému. Cena takýchto respondentov sa pohybuje od 100 do 500 PLN a nie je hradená z prostriedkov Národného fondu zdravia.
Literatúra
- Laboratórna diagnostika chorôb prenášaných kliešťami. Odporúčania pracovnej skupiny: Národná komora laboratórnych diagnostikov, Národný ústav verejného zdravotníctva - Národný ústav hygieny, Národný konzultant v oblasti infekčných chorôb, Ústav infekčných chorôb a neuroinfekcií, Lekárska univerzita v Białystoku, Poľská virologická spoločnosť, Varšava 2014.
- Rychlik U. a kol. Laboratórna diagnostika testu transformácie lymfocytov (LTT). Journal of Laboratory Diagnostics 2013, 49 (4); 425-428.
- Marques A. R. Laboratórna diagnostika boreliózy - pokroky a výzvy. Infect Dis Clin North Am. 2015; 29 (2): 295–307.
- Marques A. a kol. Počet prirodzených zabíjačských buniek sa medzi pacientmi so syndrómom po lymskej borelióze a kontrolnými skupinami nelíši. Clin Vaccine Immunol. 2009; 16: 1249-1250.
- Krzemień P. J. Dôležitosť antigénu Vlse / C6 ako markera v diagnostike skorej lymskej boreliózy a štúdiu účinnosti liečby. Zdravotné problémy civilizácie 2017; 11 (2): 87-92.
- Miąskiewicz K. a kol., Návrh nového metodického prístupu a interpretácia výsledkov protilátok proti Borrelia burgdorferi - analýza protilátkového zloženia cirkulujúcich imunitných komplexov. Reumatológia 2011; 49, 5: 328–334.
- Muraczyńska B. a Gałęziowska E. Kontroverzie týkajúce sa diagnostiky a liečby boreliózy vo svete. Všeobecné lekárstvo a zdravotnícke vedy, 2015; 21 (4): 372–377.
